黃曲霉毒素?zé)晒舛靠焖贆z測(cè)試紙條-榮獲國(guó)家技術(shù)發(fā)明二等獎(jiǎng)

      黃曲霉毒素嚴(yán)重污染以花生、稻米、植物油為代表的谷物、莢果、豆類、植物油等農(nóng)產(chǎn)品,常發(fā)生在農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)、收獲、晾曬、運(yùn)輸、儲(chǔ)藏、加工、銷售等各個(gè)環(huán)節(jié),必須從全過程檢測(cè)和監(jiān)控黃曲霉毒素,從源頭解決農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全問題。由于中國(guó)花生、玉米等農(nóng)產(chǎn)品具有小規(guī)模生產(chǎn)方式以及鮮活農(nóng)產(chǎn)品貨架期短等特點(diǎn),迫切需要檢測(cè)成本低、測(cè)定快速、適于現(xiàn)場(chǎng)定量篩查的檢測(cè)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。現(xiàn)有黃曲霉毒素檢測(cè)主要是ELISA等快速篩查技術(shù)和色譜/質(zhì)譜的確證檢測(cè)技術(shù)。本研究建立的時(shí)間分辨熒光免疫層析快速檢測(cè)技術(shù)與現(xiàn)有快速篩查技術(shù)相比具有能定量檢測(cè)、假陽性少、重復(fù)性好、操作更簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn);與確證性檢測(cè)技術(shù)相比,無需昂貴大型儀器,易于實(shí)現(xiàn)田間即時(shí)檢測(cè),適用于中國(guó)農(nóng)業(yè)檢測(cè)實(shí)際情況。

      本研究實(shí)現(xiàn)了將Eu3+包覆于硅膠機(jī)制,形成硅膠熒光微粒作為時(shí)間分辨熒光標(biāo)記物,顯著增強(qiáng)了時(shí)間分辨熒光強(qiáng)度,提高了熒光穩(wěn)定性,并且具有良好的水溶性和生物兼容性。黃曲霉毒素高特異性抗體是實(shí)現(xiàn)高靈敏時(shí)間分辨熒光檢測(cè)的核心材料。本研究使用自主研發(fā)的高特異性抗體,顯著提高檢測(cè)靈敏度。與已有的膠體金試紙條方法相比,該方法的靈敏度提高了1—2個(gè)數(shù)量級(jí)。高靈敏度的時(shí)間分辨熒光主要來源于以下3個(gè)方面：（1）時(shí)間分辨熒光具有較大Stock位移,減少了由激發(fā)光引起的特異雜散光對(duì)檢測(cè)的干擾,提高熒光檢測(cè)穩(wěn)定性;（2）時(shí)間分辨熒光壽命長(zhǎng),消除了環(huán)境中熒光物質(zhì)對(duì)待測(cè)物的干擾;（3）時(shí)間分辨熒光激發(fā)波長(zhǎng)較寬,發(fā)射光譜范圍較窄,降低了本底熒光強(qiáng)度,提高了分辨率。
      （本段引用自： 張兆威, 李培武, 張奇, 丁小霞. 農(nóng)產(chǎn)品中黃曲霉毒素的時(shí)間分辨熒光免疫層析快速檢測(cè)技術(shù)研究. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué), 2014, 47(18): 3668-3674[ZHANG Zhao-wei, LI Pei-wu, ZHANG Qi, DING Xiao-xia. Study on Time-Resolved Fluorescence Immunochromatography for Afaltoxin Determination in Agricultural Product. Scientia Acricultura Sinica, 2014, 47(18): 3668-3674] ）

      上海飛測(cè)生物聯(lián)合農(nóng)業(yè)部生物毒素檢測(cè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，推出了全球首款黃曲霉毒素B1熒光定量快速試紙條（熒光定量免疫層析法），榮獲2015年度國(guó)家技術(shù)發(fā)明二等獎(jiǎng)，打破了國(guó)外產(chǎn)品在這一領(lǐng)域的技術(shù)優(yōu)勢(shì)，性能優(yōu)于國(guó)外相關(guān)產(chǎn)品。本產(chǎn)品可在10min內(nèi)快速定量檢測(cè)各種糧食谷物、植物油、飼料原料及部分飼料中黃曲霉毒素B1的含量，樣品前處理簡(jiǎn)單，操作簡(jiǎn)便，采用熒光讀數(shù)儀讀數(shù)，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，適用于各類糧食、糧油、飼料加工企業(yè)及檢測(cè)機(jī)構(gòu)。

一、黃曲霉毒素B1熒光定量試紙條技術(shù)性能

1、 靈敏度：0.5ng/mL；
2、 定量線性范圍：1.0ng/mL - 50.0 ng/mL；

3、樣品前處理時(shí)間：8min；

4、檢測(cè)時(shí)間：10min；
5、準(zhǔn)確度：添加回收率為80%-125%；
6、 特異性：在1000 ng/mL濃度水平下與其它真菌毒素?zé)o交叉反應(yīng)；

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