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疑似霉菌毒素污染飼料及原料樣品采集方法

時間:2016-04-21來源:飛測生物點擊量:

     霉菌毒素廣義上的檢測,應(yīng)該包括取樣、制樣和分析三步。由于霉菌毒素的污染具有極不均勻性分布而且在農(nóng)產(chǎn)品中的存在是基于“μg/kg”水平,最終樣品的檢測值是不能完全代表最初樣品的真正含量,上海飛測生物科技有限公司真菌毒素檢測服務(wù)中心已經(jīng)實現(xiàn)了對原料及成品黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、赭曲霉毒素、伏馬菌素、T-2毒素的抽樣檢測。霉菌毒素樣品采集方法、采集數(shù)量對檢測結(jié)果都有一系列的影響,要保證檢測結(jié)果的客觀性,因此要縮小各環(huán)節(jié)對檢測的影響,是日常分析檢測應(yīng)該注意的事項。
      在常規(guī)樣品采集過程中,采樣方法、采樣數(shù)量和樣品質(zhì)量直接決定檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和檢測結(jié)論的科學(xué)性。因此,對采樣人員及采樣方法、技術(shù)都有特定的要求。例如:采樣人員必須是獸醫(yī)技術(shù)人員且應(yīng)熟悉采樣器具的使用,掌握正確的采樣方法?,F(xiàn)就采樣過程中需要注意的事項談幾點自己的意見:
      1、飼料及飼料原料中含有豐富的蛋白質(zhì)、淀粉、維生素等營養(yǎng)物質(zhì),加之有利的霉菌生長環(huán)境,則很容易滋生霉菌等微生物而引發(fā)飼料及原料的的霉變。飼料及原料霉變引起的資源的浪費是一項世界性的難題,農(nóng)作物在田間、收獲、加工、存儲過程中極易感染霉菌。在日常生產(chǎn)過程中,對原料及成品的質(zhì)量監(jiān)控,我們沒有辦法做到全部檢測,只能對其進(jìn)行抽樣檢測。檢測過程中取樣、制樣和分析3個步驟中都不可避免地存在著誤差。其中,取樣環(huán)節(jié)產(chǎn)生的誤差最大,占總誤差的85%以上,而制樣與分析2個環(huán)節(jié)共占總誤差的15%以下。在取樣過程中通常采用四分法取樣,將樣品磨粉,過篩網(wǎng),然后混合,平鋪成圓形,分成4等分,取相對的2份混合,然后再平分,減取樣約200g,粉碎過25目篩后,裝入樣品袋,貼好標(biāo)簽備用。對于水分含量較高的樣本,立即于65℃烘箱中烘干至恒重,然后按上述方法制成風(fēng)干樣本備用。
      2、樣品粉碎細(xì)度對檢測結(jié)果是否有影響?真菌毒素取樣的關(guān)鍵點是什么?
      樣品的粉碎其目的更重要的是將基質(zhì)混勻,以提高樣品的代表性,通常推薦粉碎細(xì)度達(dá)到75%過20目即可,但要確保樣品混合的均質(zhì)性。真菌毒素取樣的關(guān)鍵包括以下幾點:
      1) 使用適當(dāng)?shù)娜庸ぞ撸?/span>
      2) 使用適當(dāng)?shù)娜臃绞皆趦Υ娴攸c收集樣品;
      3) 適當(dāng)?shù)娜恿浚?/span>
      4) 在樣品分析前應(yīng)用紙袋或布袋儲存在干燥涼爽的地方,以避免微生物或霉菌的生長;
      5) 送至實驗室中檢測的樣品成品至少0.5公斤;原料至少1公斤;
      6) 全部樣品粉碎后,進(jìn)行二次取樣。 
      3、外觀判定的誤導(dǎo)性
      1)即使看不見霉菌,也可能有霉菌毒素(有可能是作物在田間感染霉菌存留的霉菌毒素);
      2)不經(jīng)過實驗室的分析檢測,不能正確的判定飼料及原料是否受霉菌毒素污染;
      3)不能單純的檢測飼料及原料中霉菌的含量來評判其霉菌毒素的含量;
      4)霉菌毒素作用具有協(xié)同性,通常往往飼料及原料含量多種霉菌毒素,所以在檢測的時候不能只關(guān)注黃曲霉毒素;
      5)在疑似霉菌毒素超標(biāo)的樣品,要建立正確的樣品取樣方法。
      4、在正常生產(chǎn)中由于飼料及原料產(chǎn)量大,庫存大這樣就會造成霉菌毒素檢測取樣困難的難題,不恰當(dāng)?shù)娜臃椒ㄍ荒芸陀^的反應(yīng)整體霉菌毒素污染情況。

 霉菌毒素污染樣品采樣方式
      5、樣品檢測過程中都會存在哪些誤差
      在樣品分析檢測過程中,誤差主要存在在料堆、取樣、分析這三個過程當(dāng)中,在以往的研究經(jīng)驗和文獻(xiàn)報道中,各個環(huán)節(jié)誤差大體呈現(xiàn)以下圖表分布:
 霉菌毒素污染樣品誤差來源分析
      6、樣品分析檢測過程中的單位問題“ppb、ppm”
      在當(dāng)我們拿到樣品分析檢測報告的時候,通常霉菌毒素的單位會標(biāo)識為ppb或ppm,不是專業(yè)的負(fù)責(zé)質(zhì)量管理的工作人員,通常會不理解這個單位代表的什么意思,報告中的數(shù)值代表霉菌毒素含量是高還是低,那么現(xiàn)在就對霉菌毒素的濃度單位做一個解釋。
      1ppm=1毫克/千克=1000ppb=1000微克/千克=1克/噸
      1ppm量化來說相當(dāng)于,每一噸飼料或原料里含有霉菌毒素的量是1克。
      7、取樣的原則
      樣品選取一定要具有代表性,在對不同樣品進(jìn)行取樣時,要參考相應(yīng)的推薦方法進(jìn)行樣品的選取,因為我們要相信不恰當(dāng)?shù)娜?,?jīng)檢測得到的檢測結(jié)果一定是不恰當(dāng)?shù)模@樣檢測所提供的信息往往是不正確的。
      經(jīng)過查閱文獻(xiàn)及實驗驗證,我認(rèn)為取樣主要原則應(yīng)有一下幾個方面:
      1)取樣的時候要做到多點、隨機(jī)、均勻,使得每個部位都有相同的概率被取到。
      2)取樣的點數(shù),F(xiàn)AO和WTO建議沒200公斤物料取樣一次,如果索取樣品是比較均勻的物料,可以適當(dāng)?shù)臏p少取樣點數(shù),在實際工作中由于人力、物力有限,所以在實際操作中取樣點數(shù)應(yīng)根據(jù)企業(yè)實際情況以及物料情況來確定取樣點數(shù)。
      3)取樣量,原料送檢樣品取樣成品應(yīng)在500g,原料樣品應(yīng)在1000g,這樣可以保證檢測的最低檢測量和檢測樣品的霉菌毒素的分布均一性。 
      8、取樣的方法
      1)流動物料取樣,適用于運輸卡車、火車、輪船散裝物料卸料時;筒倉物料存儲取樣口取樣;飼料企業(yè)打包出料扣取樣。
      2)飼料生產(chǎn)過程取樣,在出料扣安裝自動采樣設(shè)備或者采用鵜鶘嘴取樣器取樣。
      3)倉儲飼料取樣,對已經(jīng)進(jìn)入倉庫的飼料,按照袋裝物料的采樣程序進(jìn)行取樣。
      4)養(yǎng)殖場飼料及原料取樣,飼料樣品從料槽中中采樣,每個料槽采樣量在500g,料槽應(yīng)該隨機(jī)性選擇;原料樣品應(yīng)該從存儲袋中按照多個采樣點取樣,每次取樣1000g。
      9、成品料溫超標(biāo)時,可從以下操作、設(shè)備方面逐個排除可能的原因。操作上可能的原因有以下幾種:
      1)制粒機(jī)喂料轉(zhuǎn)速有可能過快;
      2)制粒本身的調(diào)質(zhì)溫度過高;
      3)成品含粉率偏高影響冷卻效果;
      4)冷卻風(fēng)機(jī)還未完全轉(zhuǎn)換己將成品打入冷卻器;
      5)停機(jī)時冷卻不到位手動排料過快;
      設(shè)備上可能的原因則有以下幾種:
      1)冷卻風(fēng)檔可能開啟得太??;
      2)冷卻風(fēng)機(jī)風(fēng)葉是否積塵嚴(yán)重、有無存在破損現(xiàn)象;
      3)冷卻器周壁、冷卻風(fēng)管破損存在跑風(fēng)現(xiàn)象;
      4)冷卻風(fēng)機(jī)存在缺相;
      5)料位器位置放置太高或太低、有無卡料現(xiàn)象;
      6)冷卻分料板分料是否均勻;
      7)排料柵欄間隙調(diào)整得過太、停止時是否會完全重疊;
      8)冷卻關(guān)風(fēng)器有無堵塞;
      9)冷卻排料時間設(shè)置得太短;
      10)冷卻器本身的產(chǎn)能功率是否與制粒主機(jī)相匹配。
      10、霉變?nèi)菀滓痫暳霞霸系膰?yán)重浪費,并同時會對畜禽的健康造成嚴(yán)重的危害,所以防霉、脫霉是飼料及養(yǎng)殖企業(yè)應(yīng)當(dāng)重視的首要問題,主要防范措施有:
      1)控制原料的含水量,用于飼料加工的原料水分含量不應(yīng)超過11.5%。
      2)飼料包裝袋做到密封性良好,飼料及原料存放倉庫要保持干燥和通風(fēng)良好,一般霉菌孢子在7℃條件下即可萌發(fā)生長,在20-30攝氏度的時候迅速增殖,從濕度上講,大多數(shù)霉菌在相對濕度80%以上時,生長旺盛,因此在保存時要保證環(huán)境溫度小于7℃,相對濕度控制在75%以下。
      3)添加防霉劑和脫霉劑
       通常溫度環(huán)境溫度高于7℃,相對濕度控制在75%以上時就需要使用防霉劑,尤其是在溫度和濕度相對較高的季節(jié)。 
      4)建立霉菌毒素檢測計劃


      上海飛測生物飼料及原料中霉菌毒素快速定量檢測方案--10min快速定量


    上海飛測生物基于全球領(lǐng)先的熒光定量POCT技術(shù)平臺,在國內(nèi)率先推出了霉菌毒素?zé)晒舛繖z測試紙條,本產(chǎn)品可在10min快速定量的檢測出大麥、小麥、面粉中黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素、赭曲霉毒素A、伏馬菌素、T2毒素等真菌毒素的殘留含量,樣品前處理簡單(僅需8min),檢測操作簡便,采用熒光免疫定量分析儀讀數(shù),結(jié)果準(zhǔn)確可靠且可現(xiàn)場打印,準(zhǔn)確性符合HPLC法的檢測結(jié)果,適用于各類飼料加工企業(yè)及檢測機(jī)構(gòu)。

霉菌毒素?zé)晒舛繖z測試紙條原理圖
     上海飛測生物Femdetection?霉菌毒素系列熒光定量檢測試紙條性能

飛測生物真菌毒素系列熒光定量檢測試紙條性能

      檢測所需配備的儀器和耗材

霉菌毒素檢測試紙條所需設(shè)備及耗材

      樣品前處理過程

霉菌毒素?zé)晒舛繖z測試紙條樣品前處理

      檢測操作過程

霉菌毒素?zé)晒舛繖z測試紙條操作過程

      結(jié)果判讀和輸出
      所有產(chǎn)品均采用便攜式熒光免疫定量分析儀進(jìn)行讀數(shù),使得檢測結(jié)果更加準(zhǔn)確、客觀,避免人為的誤判。
1、陰性(-):檢測結(jié)果<cutoff值(cutoff值可根據(jù)客戶的判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行調(diào)整),結(jié)果為陰性;
2、陽性(+):檢測結(jié)果≥cutoff值(cutoff值可根據(jù)客戶的判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行調(diào)整),結(jié)果為陽性;
3、 無效:讀數(shù)儀報錯,則本次檢測無效,需重新測試;
4、 檢測結(jié)果將呈現(xiàn)于熒光讀數(shù)儀液晶顯示屏上,同時可按打印鍵打印獲得紙質(zhì)的檢測報告,另外,開通儀器的WIFI數(shù)據(jù)上傳功能后,檢測相關(guān)數(shù)據(jù)信息將自動上傳至“食品安全溯源管理云平臺”,便于溯源及質(zhì)量管理。

霉菌毒素?zé)晒舛吭嚰垪l讀數(shù)儀
      飛測生物Femdetection?霉菌毒素系列熒光定量檢測試紙條產(chǎn)品亮點 
      ? 10min快速定量:集膠體金快速檢測、酶聯(lián)免疫定量檢測、色譜質(zhì)譜準(zhǔn)確檢測的特點于一身,實現(xiàn)10min內(nèi)真菌毒素的快速準(zhǔn)確定量檢測,檢測結(jié)果可現(xiàn)場打??;
      ? 內(nèi)置定量標(biāo)準(zhǔn)曲線:儀器內(nèi)置標(biāo)準(zhǔn)曲線,無需檢測時再做標(biāo)準(zhǔn)曲線,既節(jié)省了成本,也避免了操作人員與真菌毒素的接觸,保護(hù)操作人員的安全;
      ? 隨到隨檢:對檢測樣本量無要求,既可單個或少量樣本隨到隨檢,也可大量樣本同時檢測,并可實現(xiàn)現(xiàn)場檢測;
      ? 試劑全配:試劑盒中已配套所有試劑,無需檢測人員配制任何溶液,也無需對檢測樣本進(jìn)行任何pH的調(diào)節(jié);
      ? 配置要求低:對配套的儀器設(shè)備及人員要求低,最低儀器配置僅需1臺天平、1把100ul和1ml移液器即可,操作人員僅需短期培訓(xùn)就能熟練掌握;
      ? 遠(yuǎn)程網(wǎng)絡(luò)支持:儀器可通過網(wǎng)絡(luò)自動進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線讀取、軟件升級、問題故障診斷、質(zhì)量控制等;
      ? 性價比高:花膠體金試紙條的價格,獲得色譜質(zhì)譜檢測的質(zhì)量和結(jié)果,并且節(jié)省人力物力,大幅降低檢測費用;

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